本试剂盒基于乳酸脱氢酶（L-LDH）催化丙酮酸与还原型辅酶I（NADH）反应的原理，通过检测反应过程中 NADH 的消耗量，实现对样本中 L-LDH 活性的精准测定。在该反应中，NADH 在 340nm 处具有特征吸收峰，随着反应的进行，NADH 不断被消耗，其在 340nm 处的吸光度逐渐下降。通过测定反应体系中 340nm 处吸光度的变化速率，可准确计算出样本中 L-LDH 的活性L-乳酸脱氢酶催化L-乳酸(L-Lactate)氧化生成丙酮酸(Pyruvate)，在这一过程中NAD+还原为NADH；生成的NADH在电子耦合试剂1-mPMS (1-Methoxy-5-methylphenazinium methyl sulfate)的作用下将WST-8还原成橙黄色的甲瓒(Formazan)，在450nm左右有最大吸收峰。催化生成的甲瓒的量与L-乳酸脱氢酶的活性呈正比，通过测定450nm处的吸光值可以非常灵敏地检测样品中L-乳酸脱氢酶的活性。