检测原理 |
丙酮酸激酶(Pyruvate kinase, PK)催化磷酸烯醇式丙酮酸(Phosphoenolpyruvate, PEP)和ADP反应产生丙酮酸(Pyruvic acid)和ATP,在黄素腺嘌呤二核苷酸(Flavin adenine dinucleotide, FAD)、硫胺素焦磷酸(Thiamine pyrophosphate, TPP)和镁离子(Mg2+)的存在下,生成的丙酮酸进一步在丙酮酸氧化酶(Pyruvate oxidase, PO)的作用下和氧气发生氧化反应生成乙酰磷酸(Acetyl phosphate)、CO2和H2O2,再通过检测H2O2与Amplex Red的反应产物试卤灵(Resorufin)的吸光度来最终计算样品中丙酮酸激酶的酶活力。试卤灵的吸光度与样品中丙酮酸激酶的酶活力成正比。 |