检测原理 |
L-苹果酸是三羧酸循环的中间产物,也是苹果酸-天冬氨酸穿梭的重要组成部分。苹果酸-天冬氨酸穿梭是氧化磷酸化的还原当量跨线粒体膜运输过程所必需的。在低等生物体内,苹果酸在苹果乳酸发酵的过程中转化为乳酸,同时产生CO2。苹果酸常用作食品和制药工业的添加剂,苹果酸的定量分析在啤酒、葡萄酒、奶酪和水果生产领域也具有至关重要的作用。
L-苹果酸在苹果酸脱氢酶(Malate dehydrogenase, MDH)的作用下氧化生成草酰乙酸(Oxalacetic acid, OAA),在这一反应过程中NAD+被还原为NADH;生成的NADH在电子耦合试剂1-mPMS (1-Methoxy-5-methylphenazinium methyl sulfate)的作用下将WST-8还原生成橙黄色的Formazan,在450nm左右有最大吸收峰。反应体系中生成的Formazan与样品中L-苹果酸的含量成正比。 |