抗坏血酸主要有两种存在形式,分别为还原性抗坏血酸(ASA)和氧化性抗坏血酸(DHA)。ASA与DHA在生物体内构成氧化传递链,参与机体复杂的代谢过程,能促进生长和增强对疾病的抵抗力,在延缓细胞衰老与凋亡、抗癌抗肿瘤、促进胆固醇代谢等方向具有显著意义。 ASA与样本中其他还原性物质可将三价铁还原成二价铁离子,二价铁离子与联吡啶生成红色络合物,该物质在520nm处的吸光度与样本中ASA等还原性物质的量成正比,为消除其他还原物质的干扰,使用抗坏血酸氧化酶氧化ASA后,单独测定干扰物质的吸光度。将干扰物质引入去除,特异性的得到样本中ASA的含量。利用DTT将DHA还原成ASA后进行显色反应,可得到总抗坏血酸(TASA)含量。用TASA含量减去ASA含量可得DHA含量。
若只测定总抗坏血酸或还原性抗坏血酸最多可测定44个样本,若测定氧化性抗坏血酸最多可测定22个样本
|