检测原理 |
蔗糖磷酸化酶(EC2.4.1.7,Sucrose phosphorylase,Spase)是催化转移葡萄糖苷键的特异性酶,其主要分布在微生物和植物中,参与蔗糖代谢过程中的磷酸化反应。蔗糖磷酸化酶是一种碳水化合物活性酶,属于糖苷水解酶GH13家族,能够催化蔗糖和磷酸盐可逆转化,生成α-D吡喃葡萄糖磷酸和D-果糖。在反应过程中遵循双重置换机制,并能够与绝大多数糖基受体发生磷酸化、转糖基化和水解三种类型的反应。作为一种高效的转糖基化酶,蔗糖磷酸化酶因其广泛的底物专一性,在食品、化妆品、医药等领域极具应用潜力。蔗糖磷酸化酶的应用范围相对较广,在农业领域可以通过测定其活性来对作物的品质以及抗逆性进行研究;在食品工业领域可以通过测定其活性对发酵过程的参数进行监控;在生物医疗领域,通过测定蔗糖磷酸化酶活性对某些疾病进行研究。
蔗糖磷酸化酶催化的反应的底物为蔗糖和磷酸,最终生成的产物是葡萄糖- 1 -磷酸和果糖,而葡萄糖- 1 -磷酸能够在葡萄糖磷酸变位酶的催化下变位为6-磷酸葡萄糖,6-磷酸葡萄糖能够在6-磷酸葡萄糖脱氢酶的作用下还原NADP+,生成NADPH,NADPH在340nm处具有特征吸收峰。 |